流式平台培训及考核流程

所有用户必须参加流式平台培训课程并通过考核后才能获得使用资格。具体内容包括三个部分：1.理论培训 2.上机实践培训 3.考核。

一． 理论培训：

1.时间：

每学期举行两次理论培训，具体时间请关注平台通知。请任选其中一次参加，提前一周将“培训申请表” (下载路径:SII官网→公共平台→流式平台→培训申请)交至流式平台报名。

2.内容：

1)  流式细胞术基本原理和DIVA软件使用介绍

2)  流式细胞仪的基本构成及功能；

3)  流式抗体及荧光染料选择与配置；

4)  流式分析的基本原理及补偿调节；

5)  常用实验对照设置；

6)  数据分析；

7)  流式细胞仪应用。

8)  课前请自学以下内容：

"Introduction to flow cytometery "web-based training on Invitrogen website http://media.invitrogen.com.edgesuite.net/tutorials/4Intro_Flow/player.html

二．上机实践培训：（每次不超过5人）

1.申请者需具备以下条件：

1)  已经完成理论培训；

2)  获得所在课题组PI推荐，请提供PI推荐信；

3)  跟随有经验的用户进行流式细胞仪上机实习累计超过10小时，请提供实习证明信；

4)  需要承诺使用流式平台超过4小时/月。

* 满足上述条件的人员请携带所需材料至流式平台预约上机培训。

2. 时间： CantoII和FortessaX20培训时间为每周五。(如需使用平台其他仪器，请单独联系工作人员。)

3. 内容： 平台使用管理条例和上机操作SOP。　　

1)  样本准备：必须预先使用70um Cell Strainer过滤样本。

2)  开机前准备工作：检查鞘液桶、废液桶(关机液、清洗液)状态，能够正确完成鞘液添加和废液倾倒(防止线路螺旋导致传感器破坏)；FortessaX20尤其需要注意检查各处连接是否正确，鞘液桶称重等。

3)  开机程序：打开BD FACSDiva软件，仪器是否连接(选择菜单栏Cytometer-Connect)；开机后CantoII，Fortessa X20的正确排气泡操作和上样管路反冲操作。

4)  Diva软件介绍：各个对话框功能及如何调出；CantoII液流启动方法及启动成功后的标识；如何建立文件夹、实验及荧光参数设置；CantoII自动上样介绍及使用转盘和不使用转盘时的不同设置；上样仓仓门打开方式。

5)  CantoII 4色/FortessaX20 6色补偿实训。实验数据记录及阈值设置；上样速度调节、设门方法等；根据需要完成手动补偿和自动补偿操作。

6)  数据分析

7)  关机程序：重点强调实验结束后必需认真进行仪器清洗，及CantoII液流关闭介绍。

8)  关闭仪器电源，倾倒废液。

三．考核

包含理论考试和上机操作考试。

1.  理论考试：

书面闭卷考试，包括简答题10道，满分100分，80分以上为通过。内容包含理论课和上机实践课内容。

* 请已经完成上机培训的人员至平台申请考试。

2. 上机考试：

请自带样本，要求准备CantoII 4色/Fortessa X20 6色多色上机实验，熟练掌握上机前准备、开机、Diva软件操作、补偿设置、工作表建立、样本收集及数据记录、数据简单分析、清洗流程和关机流程。

* 理论考试通过后，可向平台申请上机考试。

3. 考核通过后，需签署“平台使用同意书”，承诺依照平台管理条例规范使用仪器。

培训申请表 SII FLOW CYTOMETRY CORE TRAINING APPLICATION FORM